用户测评 | 海希生物基于华大智造G99测序仪推出HLA分型检测方案

HLA精准分型检测为移植配型提供了重要理论依据，供者与受者HLA高分辨相合的移植可以提高患者的生存率，降低移植物抗宿主病发生机率。采用分子生物学手段对HLA进行分型检测已广泛应用于临床医疗服务，如异体器官移植、造血干细胞移植、安全输血，以及各种疾病关联和药物基因组学应用中。

为了准确鉴定HLA分型，提升检测的准确率，海希生物基于华大智造DNBSEQ-G99测序平台推出HLA分型检测产品-HLA高分辨分型17位点检测试剂盒（高通量测序），该产品采用杂交捕获法，在G99平台快速、灵活、简单的优势助力下，通过一次实验与检测，可同时准确、快速获取17个HLA等位基因的四位数分型结果。

01 产品方案

海希生物HLA分型检测产品针对HLA的17个基因进行检测，每个基因的目标区域设计加密探针，全面覆盖完整的外显子区域。HLA分型检测产品可兼容多种样本类型，包括外周血、口腔拭子、骨髓、脐带血等。该产品包含的具体基因及类别见下表。

表1 海希生物HLA分型检测产品覆盖基因展示

02 检测流程

图1 海希生物HLA分型检测流程

03 探针性能

1.海希研发团队自主设计探针，充分考虑基因的多态性，实现对所有型别的有效捕获，并根据最新IMGT_HLA 3.52数据库进行探针补充，保证型别准确报出。

2.采用非重叠平铺式探针设计，利用6000多条探针即可捕获约216kb目标区域，且捕获均一性极好，如左下图所示为本次测试的16例样本所有位点的平均测序深度均在200左右，右下图即可直接展示出覆盖度的均一性情况。

图2 海希生物HLA共16个样本覆盖度展示

04 测试结果

1.海希生物HLA分型检测方法与PCR-SBT检测方法分型结果比对

选用UCLA室间质评标准品共16例，利用海希生物HLA分型检测流程进行检测，同时对这16例样本进行PCR-SBT分型检测。对样本整体检测结果评估，结果表明，海希生物通过G99测序的HLA分型检测的分型结果与PCR-SBT分型结果比对一致，符合率达到100%。分型检测中，使用的试剂盒产品包含：1）海希生物HLA 高分辨分型17 位点检测试剂盒（NGS）；2）940-001647-00 DNBSEQ 一步法DNB制备试剂盒 V4.0 OS-App 4 Rxn/Kit；3）940-000413-00 DNBSEQ-G99RS高通量测序试剂套装（G99 SM App-C FCL PE150）。具体分型结果见附录。

表2 海希生物HLA与PCR-SBT分型检测结果对比

2.海希生物HLA分型检测结果与室间质评提供的标准分型结果比对

同时，对于以上16个室间质评样本的HLA II类基因在G99上的检测结果与室间质评提供的标准分型结果比对，四分位分型完全一致(见下表)。

表3 HLA与标准分型检测结果对比

05 海希生物HLA产品分析亮点

1.HLA基因多态性与人类多种疾病和用药具有高度相关性：结果可展示CPIC指南用药相关型别和常见疾病相关型别。

2.根据IMGT/HLA网站，结果可提示受/供者HLA-B先导基因型和移植后患GVHD风险。

图3 HLA基因与疾病相关性

06 海希生物HLA产品特点总结

高效：自主设计探针捕获效率高，目标基因捕获区域覆盖均一性好。

准确：覆盖HLA低、中、高分辨分型，正确率100%。分型精度一般为4 位或者6位，最高可达8位精度分型，有效解决其他技术无法判定的模棱两可型别。

专业：专业研发和服务团队，可帮助客户发现新基因型别和开展后续科研工作。

经济：使用HLA高分辨分型17位点检测(高通量测序)项目试剂盒，支持大批量样本上机，能有效降低实验成本。

07 G99在HLA分型检测应用中的优势

1.24小时内完成HLA全流程检测

G99在12小时内即可完成PE150测序，显著缩短了检测的总时间。在移植医学或免疫学领域，快速的结果反馈能够为患者提供更迅捷的治疗决策。

2.简单便捷的操作流程

G99操作界面直观简洁，确保实验室人员能够方便、准确地进行检测，操作方法简单易学。

3.灵活多样的上机模式

G99的双载台设计，可随时开启测序工作，适应多样化的应用需求，同时实现检测的准确性和广泛性。

G99测序仪帮助用户在HLA分型检测的应用中24小时内极速获取准确的检测结果，为高通量测序技术在HLA分型检测拓展了更多的应用场景。2023年9月，G99已获批国家药品监督管理局(NMPA)医疗器械注册证，被准许在国内市场应用于临床，支持临床方向多种DNA和RNA基因检测应用需求。G99以其极致的测序速度、灵活简单的上机体验、高效多样的测序选择，持续赋能用户，助力行业发展。

附录